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Was bringen Restriktionsenzyme?
Restriktionsenzyme sind wichtige Werkzeuge in der klassischen und modernen Molekularbiologie. Restriktionsenzyme, auch Restriktions-Endonukleasen, erkennen spezifische DNA Sequenzen und schneiden die DNA dann direkt an der Erkennungsstelle oder in einem definierten Abstand (siehe auch Typen von Restriktionsenzymen).
Welche Typen von restriktionsendonukleasen gibt es?
Klassifizierung
- Typ I schneidet die DNA an einer zufälligen Stelle weit von der Erkennungssequenz entfernt.
- Typ II schneidet die DNA innerhalb oder in unmittelbarer Nähe der Erkennungssequenz.
- Typ III schneidet die DNA etwa 20 bis 25 Basenpaare von der Erkennungssequenz entfernt.
Wie arbeitet ein restriktionsenzym?
Die Restriktionsenzyme erkennen fremde DNA am fehlenden Methylierungsmuster oder an einer sonst nicht vorkommenden DNA-Sequenz und hydrolysieren dann die Fremd-DNA. Sie treten daher im Bakterium immer zusammen mit typischen DNA-Methyltransferasen auf, die der bakterieneigenen DNA kennzeichnende Muster aufprägen.
Was sind die Einsatzgebiete von Restriktionsenzymen?
Einsatzgebiete von Restriktionsenzymen. Restriktionsenzyme werden in der Molekularbiologie traditionell für die Klonierung eingesetzt. Hier wird der Verdau der DNA durch die Enzyme genutzt, um kompatible DNA Enden zu erzeugen. Diese Enden werden anschließend mittels einer DNA Ligase verbunden.
Wie begann die Entdeckung der Restriktionsenzyme?
Mit der Entdeckung der Restriktionsenzyme 1967/68 durch Isolierung aus Bakterien begann die Entwicklung der Molekularbiologie. Sie ermöglichen die gezielte Herstellung von DNA-Fragmenten (Restriktionsfragmente), die dann isoliert und seit 1972 mit Hilfe von Ligasen zu neuen Konstruktionen zusammengesetzt werden können.
Was ist ein Restriktionsenzym?
Benötigt ATP und transferiert eine Methylgruppe von S-Adenosyl-Methionin. Im allgemeinen Sprachgebrauch wird der Begriff Restriktionsenzym meist mit den Restriktionsendonukleasen vom Typ II gleichgesetzt, da die Enzyme der Typen I und III in der Molekularbiologie nur eine geringe Bedeutung besitzen.
Was sind die Antagonisten der Restriktionsenzyme?
Die Antagonisten der Restriktionsenzyme sind die sogenannten Ligasen . In der Regel bezeichnet der erste Buchstabe die Gattungsnamen der prokaryontischen Zelle, aus dem das Restriktionsenzym stammt. Die darauf folgenden zwei Buchstaben die Art des Bakteriums.